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定氮儀的應(yīng)用原理
農(nóng)產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的含量是考核其質(zhì)量的重要指標(biāo)，通過測定蛋白質(zhì)來判斷其農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量是否達(dá)標(biāo)，比如很多糧油監(jiān)測站、食藥監(jiān)、牛奶廠、飼料廠等等，有一項(xiàng)工作就是檢測農(nóng)產(chǎn)品中蛋白質(zhì)的含量，而在這項(xiàng)工作中很多工作人員都采用定氮儀來直接檢測了，放棄以往人工檢測的形式，提高了工作的效率和速度，然而還有很多工作人員是初次接觸到這類儀器，可以對(duì)他的操作步驟不了解，導(dǎo)致工作很難進(jìn)行下去，下面我就為大家介紹下它的應(yīng)用原理及操作步驟。
定氮儀檢測樣品蛋白質(zhì)含量分為以下步驟：
第一步：消化/消解（將有機(jī)物樣品轉(zhuǎn)化為無機(jī)物）
1、準(zhǔn)備消化管（根據(jù)消解儀的工位數(shù)來定），標(biāo)號(hào)。1、2、3號(hào)消化管中分別加入適當(dāng)濃度的蛋白溶液1.0mL，樣品要加到消化管底部，切勿沾在瓶口及瓶頸上。再依次加入硫酸鉀硫酸銅<接觸劑0.3g，濃硫酸2.0mL，30%過氧化氫1.0mL。4、5、6號(hào)燒瓶作為空白對(duì)照，用以測定試劑中可能含有的微量含氮物質(zhì)，對(duì)樣品測定進(jìn)行校正。4、5、6號(hào)消化管中加入蒸餾水1.0mL代替樣液，其余所加試劑與1、2、3號(hào)燒瓶相同。
2、將加好試劑的各消化管放置消化架上，接好抽氣裝置。用控溫方式分段加熱，此時(shí)消化管內(nèi)物質(zhì)炭化變黑，并產(chǎn)生大量泡沫，務(wù)必注意防止氣泡沖出管口。待泡沫消失停止產(chǎn)生后，加大火力，保持消化管內(nèi)液體微沸，至溶液澄清后，再繼續(xù)加熱使消化液微沸15min。消化時(shí)放出的氣體內(nèi)含SO2，具有強(qiáng)烈刺激性，因此自始自終應(yīng)打開抽水泵將氣體抽入自來水排出。整個(gè)消化過程均應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。消化完全后，關(guān)閉加熱裝置，使消化管冷卻至室溫。
第二步：蒸餾和吸收蒸餾和吸收是在微量定氮儀內(nèi)完成。
蒸餾這個(gè)動(dòng)作也是非常關(guān)鍵的，加熱蒸餾的過程中，加酸、加堿、加稀釋液目前市場上都是自動(dòng)完成的，特備注意的是堿液一定要過量，原因是堿液與消解后的樣品酸液完全反應(yīng)，否則測試數(shù)據(jù)是不正確的。
第三步：滴定，蒸餾收集結(jié)束后，就是滴定。
方法有兩種：1、是用半自動(dòng)定氮儀，手動(dòng)滴定，肉眼觀察滴定的終點(diǎn)顏色的變化，確定滴定完成，計(jì)算出氮含量，然后通過樣品的轉(zhuǎn)化系數(shù)，求取蛋白質(zhì)樣品的含量。
2、全自動(dòng)定氮儀，通過光學(xué)顏色傳感技術(shù)，定氮儀邊蒸餾邊滴定的方式，自動(dòng)計(jì)算結(jié)果，打印結(jié)果。
