植物葉片全氮含量的測定方法
作者：祎鴻儀器 點(diǎn)擊率： 發(fā)布時間：2017-11-12 14:20:00
植物葉片是多年生常綠木本植物，僅憑經(jīng)驗(yàn)難以準(zhǔn)確掌握植株的營養(yǎng)狀況，必須同時進(jìn)行樹體營養(yǎng)診斷分析，才能做到準(zhǔn)確判斷樹體營養(yǎng)水平，實(shí)現(xiàn)定量、高效、平衡施肥。氮是植物需求量最大的礦物質(zhì)營養(yǎng)元素，同時也是植物個體乃至自然生態(tài)系統(tǒng)和人工生態(tài)系統(tǒng)（包括農(nóng)業(yè)系統(tǒng)）生長最常見的限制因子。氮素是作物生長的重要營養(yǎng)元素之一，通過測定不同區(qū)域、不同部位和不同程度的植物葉片葉片中氮的含量，可以監(jiān)測土壤營養(yǎng)的動態(tài)變化，從而達(dá)到高效施肥與高效利用肥料的目的，也可以為研發(fā)推廣植物易缺乏營養(yǎng)元素的高效增補(bǔ)措施和開發(fā)專用多元素平衡肥料提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
1 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 植物葉片葉片氮含量的測定方法 本實(shí)驗(yàn)采用國家標(biāo)準(zhǔn)方法凱氏定氮法，以硫酸銅和硫酸鉀作為催化劑，加入濃硫酸消解植物葉片葉片樣品，用全自動凱氏定氮儀來測定氮的含量。
1.2 實(shí)驗(yàn)原理 全氮的測定采用凱氏消解方法，用硫酸銅和硫酸鉀作為催化劑，加入濃硫酸消煮，在高溫下將植物葉片葉片中的含氮化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榱蛩徜@，然后用氫氧化鈉堿化，加熱蒸餾出氨，經(jīng)硼酸吸收后，用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定而計(jì)算全氮量。反應(yīng)原理如下：
（NH4）2SO4+2NaOH→Na2SO4+2H2O+2NH3↑；
NH3+H3BO3→NH4H2BO3；
NH4H2BO3+HCl→H3BO3+NH4Cl。
計(jì)算系統(tǒng)根據(jù)下列公式計(jì)算含氮量：
N（%）=14.01×C ×（V-VO）/1000W
式中：C=標(biāo)準(zhǔn)酸濃度（mol/L）；
W=樣品質(zhì)量（g）；
VO=空白樣滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）；
V=樣品滴定標(biāo)準(zhǔn)酸消耗量（mL）。
1.3 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
1.3.1 儀器 pH計(jì)；電子分析天平；電熱鼓風(fēng)干燥箱；凱氏消解儀；全自動凱氏定氮儀；
1.3.2 試劑 硫酸鉀與硫酸銅質(zhì)量比為10∶1混合催化劑；濃硫酸（AR）；400g/L NaOH溶液；甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑；20g/L硼酸溶液；0.0400mol/L 1/2 NaB4O7標(biāo)準(zhǔn)溶液；1mol/L鹽酸溶液；0.04mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
1.4 樣品處理
1.4.1 植物葉片葉片樣品采摘 在果樹東南西北方向上的上中下各部位各摘取10～20葉片，混合裝入保鮮袋中。
1.4.2 植物葉片葉片樣品制備 為了確保葉片營養(yǎng)不損失，采摘的葉片樣品宜在24h內(nèi)制備好或放在4℃左右的冰箱里存放。植物葉片葉片制備分為清洗和烘干2個部分：（1）清洗：將葉片依次放在0.1%的洗潔劑溶液、自來水、0.2%鹽酸溶液、自來水里清洗，最后用蒸餾水洗凈，整個過程不宜超過2min；（2）烘干：將洗凈的葉片平鋪在托盤里，放進(jìn)烘箱，在105℃殺青30min，之后在65℃連續(xù)烘24h。烘好的樣品經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，裝入密封樣品袋里中備用。
1.4.3 消解 用減量法稱取烘干后制備樣品0.2g（精確到0.000 1g），用紙槽送入到消解管底部，然后加1.0g混合加速劑，搖勻，再加入5mL濃硫酸，混勻。將消解管放在石墨消解槽中，開電源，打開冷凝水源，調(diào)溫，一般150℃預(yù)熱約1h，后調(diào)溫至400℃消解1.5h（為不至讓溫度升值過快，過高，可以先調(diào)溫到380℃左右，后再升至400℃保持1.5h），待消解管冷卻后取出，以供氮的測定。
1.5 全氮測定 將各試劑分別裝入凱氏定氮儀中相應(yīng)的試劑桶中。測定過程為：打開儀器電源，開冷凝水，儀器初始化；測定前放一空定氮管在儀器置管架上，且應(yīng)盛有少量的水。然后手動調(diào)試，依次進(jìn)行加堿，加硼酸，蒸餾，滴定，排液。
